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Buffer瓶的制备方法和步骤
Buffer瓶的制备方法和步骤实际上是指缓冲液(Buffer Solution)的配制过程,并将其储存在特定的容器中(如试剂瓶),以便后续实验使用。
由于“Buffer瓶”这一表述可能指的是装有缓冲液的容器,以下我将详细介绍一种常见缓冲液——TBE(Tris/Borate/EDTA)电泳缓冲液的配制
方法和步骤,以及一般性的缓冲液储存建议。
TBE电泳缓冲液的配制方法
一、准备工作
准备所需材料:Tris碱、硼酸、EDTA(通常使用EDTA二钠盐)、去离子水、容量瓶(如1L)、烧杯、磁力搅拌器(可选)、pH计(可选,但
TBE缓冲液通常不需要精确调节pH)。
清洗所有玻璃器皿,确保无杂质。
二、配制步骤
1 . 准确称取组分:
Tris碱:54g
硼酸:27.5g
EDTA二钠盐(注意:EDTA二钠盐需要先用少量去离子水溶解,因为EDTA在水中的溶解度较低,且加入NaOH有助于溶解):3.72g(如果
使用EDTA二钠盐八水合物,则为2.92g)
2 . 溶解:
将称好的Tris碱和硼酸加入烧杯中,加入约800mL的去离子水。
使用磁力搅拌器充分搅拌,直至完全溶解。
将EDTA溶液(如果之前单独溶解)缓慢加入烧杯中,继续搅拌至混合均匀。
3 . 定容:
将溶液转移至容量瓶中,用去离子水清洗烧杯2次,将清洗液也一并移入容量瓶。
继续加入去离子水,直至溶液体积达到容量瓶的刻度线。
轻轻摇晃容量瓶,使溶液混合均匀。
4 . 储存:
将配制好的TBE缓冲液转移至干净的试剂瓶中,贴上标签,注明名称、浓度、配制日期等信息。
室温保存,避免阳光直射。TBE缓冲液可以稳定储存数月,但建议定期检查是否有沉淀或变色。
三、一般性缓冲液储存建议
1 . 温度控制:根据缓冲液的性质,可能需要冷藏或室温保存。遵循具体缓冲液的储存要求。
2 . 定期检查:定期检查缓冲液是否有沉淀、变色或异味,这些都可能是变质的迹象。
3 . 无菌处理:对于需要无菌的缓冲液,应在无菌条件下配制和储存,并加入适当的防腐剂以防止微生物污染。
4 . 避光保存:许多缓冲液对光敏感,应储存在棕色或深色试剂瓶中,并置于阴凉处。
请注意,不同类型的缓冲液其配制方法和储存条件可能有所不同,因此在实际操作时应参考具体的实验指南或试剂说明书。